金黃色葡萄球菌測試片
1、原理及適用范圍
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡稱金葡菌)是人類最常見的致病菌之一，其侵襲力很強，能產(chǎn)生多種致病物質(zhì)如：腸毒素、凝固酶等；可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問題，我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報道。金黃色葡萄球菌測試(FilmplateTM Staphylococcus aureus BT206) 含有選擇性培養(yǎng)基和專一性的酶顯色劑，運用微生物測試片專有技術(shù)，做成一次性快速檢驗產(chǎn)品，一步培養(yǎng)15～24h就可確認是否有病原菌的存在，大大地簡化了檢測程序。本產(chǎn)品適用于各類生、熟食制品，飲料，糕點類，調(diào)味品，奶制品等的快速檢測。執(zhí)行標準：食品安全國家標準食品微生物檢驗黃色葡萄球菌檢驗（GB/T 4789.10-2010）。
2、操作方法
2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.0～8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的樣品勻液，以此類推，每次換一支吸管。
2.2、接種：一般食品選2～3個稀釋度進行檢測，將金黃色葡萄球菌測試片（BT206）置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右，使培養(yǎng)基凝固，每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。
2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。
3、結(jié)果判讀
培養(yǎng)后，測試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌；呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽性菌落的樣本，最好用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗一次。
4、計數(shù)原則及報告方式
4.1、選擇菌落數(shù)在20～200個之間的紙片進行計數(shù)。
4.2、若兩個稀釋度的菌落數(shù)均在20～200之間，則取其平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為每毫升（或每克）樣品中金黃色葡萄球菌數(shù)。
4.3、如果所有稀釋度的測試片上的菌落數(shù)都小于20，則計數(shù)稀釋度最低的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之；如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報告之。
4.4、如果所有稀釋度的菌落數(shù)都大于200，計數(shù)最高稀釋度的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。計數(shù)菌落數(shù)大于200的測試片時，也可計數(shù)一個或兩個具有代表性的方格內(nèi)的菌落數(shù)，換算成單個方格內(nèi)的菌落數(shù)后乘以20（濾紙區(qū)面積為20cm2），即為測試片上估算的菌落數(shù)。報告單位以CFU/mL（或CFU/g）表示。
5、附加說明
5.1、本產(chǎn)品對于提高衛(wèi)生行政監(jiān)督部門應(yīng)對細菌性食物中毒等突發(fā)性公共衛(wèi)生事件的能力，具有重要的作用。
5.2、山東省疾病預(yù)防控制中心的驗證結(jié)果表明，當金黃色葡萄球菌在0～9個菌落范圍內(nèi)時，測試片與血平板均能檢出，作為致病菌不得檢出的標準要求，可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應(yīng)用。
5.3、經(jīng)試驗，該測試片的檢測靈敏度高，特異性強，重復(fù)性好。對純菌的檢測下限可達3cfu／mL，與營養(yǎng)瓊脂計數(shù)、Baird-Parker培養(yǎng)計數(shù)和顯色培養(yǎng)基計數(shù)比較，檢測結(jié)果均無顯著差異。（食品研究與開發(fā)2009，30（1）：94-97）
5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
6、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，最好在拆封前將整包回溫至室溫。
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